Más consejos para la liofilización del kit de diagnóstico por PCR

 

◾No omita el paso de secado secundario: durante esta parte del proceso, elimina la mayor cantidad de agua posible, que es el objetivo de realizar esta técnica en primer lugar.

◾Apunte a un contenido de humedad final en el rango de 1-3%: Esto reitera mi primer punto. Para lograr este rango, necesitará una fase de secado secundaria una vez que todo el hielo se haya sublimado. También recomendaría medir la humedad utilizando la titulación Karl-Fisher. Solo como nota al margen, existen otros métodos, como el mapeo de humedad del método de liofilización, lea sobre los de mi publicación anterior en el blog.

◾Optimice la estabilidad de la formulación con reactivos adicionales: considere el uso de excipientes, como agentes de carga, para estabilizar soluciones con bajo contenido de sólidos. Para aumentar la temperatura del estante para un secado por congelación más seguro y rápido de los kits de diagnóstico de PCR, intente agregar modificadores de temperatura de colapso a su muestra.

◾Haga que los ajustes de vacío más altos funcionen para usted: la transferencia de calor por convección es importante en la liofilización, particularmente para lograr una distribución uniforme del calor en el estante y para mitigar el efecto de borde causado por las diferencias en la transferencia de calor radiante. Normalmente, recomendaría usar configuraciones de vacío ligeramente más altas, como 100 mTorrs en lugar de 60 mTorr, para lograr un lote más homogéneo. Sin embargo, muchos reactivos de PCR tienen temperaturas de fusión / colapso muy bajas, por lo que es posible que no siempre sea factible un ajuste de vacío más alto durante la liofilización de los kits de diagnóstico de PCR. Pero si está comprometido con la idea, puede agregar excipientes a la mezcla de PCR, que aumentan la temperatura de colapso y permiten el uso de configuraciones de vacío más altas. Me gustaría señalar un beneficio adicional, principalmente que los ajustes de vacío más altos también reducen la posibilidad de un flujo de vapor ahogado al condensador.

Si desea ampliar su proceso, podría pensar en utilizar ensayos en formato de perlas liofilizadas, que aportan varias ventajas a la mesa. Estas formulaciones ofrecen gránulos homogéneos con densidad controlada y distribución de tamaño de partícula pequeña. De hecho, cada perla contiene un volumen específico de reactivo. Con las mezclas liofilizadas, elimina la formación de alícuotas, la congelación-descongelación y el pipeteo, todo lo cual reduce los errores y mejora la eficiencia de uso. Los productos liofilizados también se pueden reconstituir rápidamente y se pueden liofilizar grandes cantidades de perlas simultáneamente para permitir la producción a gran escala en una unidad de laboratorio de I + D.